Facultad Politécnica - Universidad Nacional de Asunción

Aranduka Vol. 1, nº 2 (Dic. 2010) 

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absorbancia A, se define como la inversa del 

logaritmo en base 10 de la transmitancia T. Las 

leyes fundamentales de la espectrofotometría, se 

obtienen por la combinación de la ley de Lambert 

- Beer, del conjunto de estas leyes, resulta de la 

siguiente ecuación:

A = abc = -log T = -log (I/Io) = log (Io/I) 

Estas ecuaciones, indican que la representación 

gráfica de la absorbancia A, en función de la 

concentración c, es una línea recta de pendiente 

a, mientras que la transmitancia T. En función 

a la concentración, es una curva logarítmica 

decreciente, siempre y cuando, la sustancia dada 

tenga un camino óptico b constante. Esto se 

aprecia en la figura 1.

Fig. 1. Transmitancia y Absobancia vs concentración

2.2 Los componentes básicos de un fotómetro 

2.2.1 Fuentes de emisión de luz 

Las fuentes de energías radiantes, están 

compuestas por elementos que pueden excitarse 

a un estado de nivel energético elevado, 

generalmente, por calentamiento eléctrico, y 

cuando recuperan su estado de energía natural, 

emiten fotones de energías radiantes. Algunos 

de estos elementos, tienen numerosos niveles 

de energía, tan próximos unos a los otros, que 

las longitudes de onda de la radiación emitida, 

forman un espectro continuo de radiación, y 

algunos abarcan una región extensa.

Para el empleo de fuente de energía radiante, se 

utilizan semiconductores conocidos como LED, 

siglas en inglés Ligth Emitting Diode (diodo 

emisor de luz). El fenómeno de la emisión de 

luz, puede ser explicado con la teoría de la banda 

de energía en los semiconductores. Un voltaje 

externo aplicado en la junción PN (positivo-

negativo), para su polarización directa excita 

los electrones, moviéndolo desde la banda de 

conducción del lado N, a la banda de valencia 

de lado P. En el traslado los electrones, cruzan 

la brecha de energía Eg, cediendo este potencial 

en forma de calor y de luz (fotones); en otros 

términos, de la misma manera que un diodo 

absorbe energía en la generación de pares 

electrón-hueco, esta energía vuelve a ser emitida 

cuando se recombinan los electrones con los 

huecos. La emisión de la radiación se cumple 

toda vez que la energía sea suficiente para que 

los electrones escapen del material en forma de 

fotón.

2.2.2 Monocromadores

Las fuentes de radiación que comúnmente se 

emplean en espectrofotometría emiten radiación 

continua dentro de un amplio margen de 

longitudes de onda. Sin embargo, las bandas 

angostas presentan muchas ventajas:

a) La radiación de banda angosta permite la 

resolución de bandas de absorción muy 

próximas

b) Con radiación de banda angosta un pico se 

puede medir perfectamente en su máxima 

absorción, aumentando así la sensibilidad

c) La absorción de radiación de banda angosta 

se apega más a la ley de Beer porque se mide 

exclusivamente la radiación que se absorbe.

Debido a estas ventajas, se justifica el uso 

de complementos que reduzcan la radiación 

policromática de la fuente de banda ancha 

a bandas angostas, o emplear radiación 

monocromática. Actualmente, se usan dos tipos 

de aditamentos, filtros y monocromadores de 

prisma o de rejilla de difracción. (Pecsok, 1990)

2.2.3 Recipientes para muestras

Los tipos de recipientes utilizados, dependen de la 

zona de espectro de radiación a ser determinado, 

por ejemplo, las muestras que se estudian en 

la región ultravioleta o visible se colocan en 

celdas o cubas, en la región del ultravioleta se 

usan celdas construidas con material de cuarzo